تبلیغات
شیمی و آزمایشگاه شیمی - کروماتوگرافی لایه نازک (TLC)

کروماتوگرافی لایه نازک (TLC)

نویسنده :Minaeifar
تاریخ:چهارشنبه 3 مرداد 1386-11:07 ق.ظ

کروماتوگرافی لایه نازک (TLC)

کروماتوگرافی لایه نازک نوعی کروماتوگرافی جذبی جامد – مایع است و اصول آن مانند کروماتوگرافی ستونی است. ولی در این مورد جسم جاذب جامد را به صورت یک لایه نازک در روی یک قطعه شیشه یا پلاستیک محکم پخش میکنند. یک قطره از محلول نمونه یا مجهول را در نزدیکی لبه صفحه میگذارند و صفحه را همراه مقدار کافی از حلال استخراج کننده در ظرفی قرار میدهند. مقدار حلال باید آنقدر باشد که فقط به سطح زیر لکه برسد (شکل الف). حلال به طرف بالای صفحه میرود و اجزاء مخلوط را با سرعتهای متفاوت با خود میبرد. در نتیجه ممکن است تعدادی لکه روی صفحه ظاهر شود. این لکه ها روی یک خط عمود بر سطح حلال ظرف قرار میگیرند (شکل ب).

 

 

این روش کروماتوگرافی بسیار آسان است و به سرعت هم انجام میشود. این روش برای تفکیک اجزاء یک مخلوط بسیار مفید است و همچنینی میتوان از آن برای تعیین بهترین حلال استخراج کننده جهت کروماتوگرافی ستونی استفاده کرد.

در TLC میتوان از همان مواد جامد که در کروماتوگرافی  ستونی استفاده میشود استفاده کرد و در این میان سیلیکا و آلومینا بیشتر به کار میرود. معمولا جسم جاذب را با مقدار کمی از ماده نگهدارنده مانند گچ شکسته بندی، کلسیم سولفات و یا نشاسته مخلوط میکنند تا جسم جاذب چسبندگی لازم را پیدا کند و به صفحه بچسبد. صفحه ها را میتوان قبل از مصرف تهیه کرد و یا از ورقه های پلاستیکی آماده که در بازار موجود است استفاده نمود.

یکی از مزایای مشخص TLC آن است که احتیاج به مقدار بسیار کمی از نمونه دارد. در بعضی موار میتوان تا مقدار 9-10 گرم را تشخیص داد. اما ممکن است اندازه نمونه تا 500 میکرو گرم برسد. در نمونه های زیاد میتوان از تجربه های تهیه ای استفاده کرد. در این تجربه ها لکه های مختلف را میتراشند و با یک حلال مناسب میشویند (استخراج میکنند). و برای شناسایی (از طریق طیف سنجی) به کار میبرند.

تشخیص لکه های رنگین در روی کروماتوگرام آسان است و برای تعیین محل لکه های اجسام بیرنگ روشهای متعددی وجود دارد. برای مثال میتوان با تابش نور ماوراء بنفش به صفحه محل لکه، ترکیبهایی را که خاصیت فلوئورسانس دارند مشخص کرد. به روش دیگر میتوان جسم جاذب را با ماده فلوئورسانس دار بی اثر دیگری مخلوط کرد. هنگامی که نور ماوراء بنفش به این صفحه بتابد، لکه اجسامی که نور ماورای بنفش را جذب می کنند ولی خاصیت فلوئورسانس ندارند در زمینه فلورسانس دار صفحه به صورت تیره رنگ ظاهر میشوند. در بسیاری موارد دیگر، از معرفهای آشکارساز دیگری استفاده میکنند. این معرفها را میتوان بر روی کروماتوگرام پاشید و لکه ها را ظاهر کرد. سولفوریک اسید، که بسیاری از ترکیبات آلی را به ذغال تبدیل میکند و محلول پتاسیم پرمنگنات نمونه هایی از معرفهای آشکار ساز هستند که به این روش مصرف میشوند. ید نیز معرف آشکار ساز دیگری است که مصرف میشود. در این مورد صفحه را دز ظرفی میگذارند که محیط آن از بخار ید اشباع باشد. بسیاری از ترکیبات آلی ید را جذب میکنند و لکه آنها روی کروماتوگرام رنگین (معمولا قهوه ای) میشود.

در شرایط معین سرعت حرکت ترکیب نسبت به سرعت پیشرفت حلال (Rf) خاصیت مشخصی از ترکیب است. برای تعیین این مقدار مسافتی را که جسم از خط شروع تا وسط لکه را طی کرده است اندازه میگیرند و آنرا به مسافتی که حلال پیموده تقسیم میکنند. این مسافت را با خط شروع یکسانی میسنجند.

 

 

بخش عملی

تفکیک مواد رنگی برگ سبز

چند میلی لیتر از مخلوط 2 به یک اتر نفت و اتانول را همراه با چند برگ سبز در هاونی بگذارید و برگها را با دسته هاون له کنید. مایع بدست آمده را به یک قیف جدا کننده منتقل کنید و همان حجم آب مقطر به آن اضافه کنید و تکان دهید. فاز آبی پایینی را دور بریزید. این شستشو را دو بار انجام دهید و هر بار فاز آبی را دور بریزید. و آب تازه اضافه کنید.لایه آلی (بالایی) را به ارلن کوچکی منتقل کنید و به آن 2 گرم سدیم سولفات بدون آب اضافه کنید (برای آب گیری).

یک نوار 10 سانتی از ورقه کروماتوگرام سیلیکاژل تهیه کنید و یک لکه 1 الی 2 میلی متری از محلول ماده رنگی را طوری بر روی صفحه قرار دهید که حدود 1 و نیم سانتی متر از انتهای آن فاصله داشته باشد (برای گذاشتن لکه از لوله مویین تمیز استفاده کنید). صبر کنید تا لکه خشک شود. برای جداسازی از حلال بنزناستون با نسبت 7 – 3 (حجمی) مطابق توضیحات بالا استفاده کنید.

ممکن است تا هشت لکه رنگین مشاهده شود. این لکه ها به ترتیب کاهش مقدار Rf عبارتند از کاروتنها (دو لکه نارنجی)، کلروفیل a (آبی – سبز)، کلروفیل b (سبز) و زانتوفیلها (چهار لکه زرد).

 



نوع مطلب : کروماتوگرافی 

داغ کن - کلوب دات کام
نظرات() 
Buy generic cialis
شنبه 18 فروردین 1397 07:26 ق.ظ

Wonderful advice. Kudos.
costo in farmacia cialis cialis 5 mg schweiz tadalafil 5mg cialis para que sirve tarif cialis france india cialis 100mg cost side effects of cialis walgreens price for cialis click here take cialis cialis dosage amounts
Cialis pills
دوشنبه 28 اسفند 1396 12:10 ب.ظ

Thanks! I value it.
cialis reviews cialis pas cher paris online cialis cialis generique 5 mg tadalafil 5mg cialis from canada prescription doctor cialis brand cialis generic can i take cialis and ecstasy buy cheap cialis in uk
How do you get a growth spurt?
شنبه 1 مهر 1396 10:40 ب.ظ
Greetings! Very helpful advice in this particular post!

It is the little changes which will make the biggest changes.
Thanks for sharing!
vernitawitchey.hatenablog.com
یکشنبه 15 مرداد 1396 02:51 ب.ظ
Great website. Lots of helpful info here. I am sending it to a few buddies ans also sharing in delicious.
And obviously, thanks to your effort!
oleneamaya.hatenablog.com
جمعه 13 مرداد 1396 02:02 ب.ظ
An impressive share! I have just forwarded this onto a friend who
has been doing a little homework on this.
And he actually bought me lunch simply because I stumbled upon it for him...
lol. So allow me to reword this.... Thanks for the meal!!
But yeah, thanks for spending time to discuss this topic here on your
website.
How long does Achilles tendonitis last for?
شنبه 7 مرداد 1396 11:35 ب.ظ
I have read so many articles concerning the blogger lovers however this piece of
writing is in fact a nice paragraph, keep it up.
BHW
سه شنبه 29 فروردین 1396 05:54 ب.ظ
Simply wish to say your article is as astounding. The
clearness in your put up is just nice and i can assume
you're knowledgeable on this subject. Fine with your permission let me to clutch your
RSS feed to stay updated with drawing close post.

Thank you one million and please continue
the enjoyable work.
BHW
جمعه 25 فروردین 1396 02:12 ب.ظ
Ahaa, its fastidious conversation concerning this article here at this website,
I have read all that, so now me also commenting at this place.
ali
شنبه 13 مرداد 1386 12:08 ب.ظ
با سلام
پیشنهاد ما به شما
به آدرس زیر بروید و کد لینک باکس را در قسمت ویرایش قالب خود کپی کرده و لینک خود را به لینک باکس ارسال کنید و دیگر بدون اینکه سایت و یا وب خود را بروز کنید آمار و ترافیک و تعداد بازدید روزانه آنرا افزایش دهید .
آدرس لینک باکس : WwW.link86.mihanblog.CoM
موفق باشید .
 
لبخندناراحتچشمک
نیشخندبغلسوال
قلبخجالتزبان
ماچتعجبعصبانی
عینکشیطانگریه
خندهقهقههخداحافظ
سبزقهرهورا
دستگلتفکر